我想用PCR产物自己连着成一个质粒 该如何操作

我想用PCR产物自己连着成一个质粒 该如何操作 为什么质粒与PCR产物一同跑电泳,质粒会比PCR产物跑的快呢?质粒是用水溶的 您好 pEGFP质粒进行PCR得到的产物是什么 环化的PUCmT载体用Ecor1酶切后电泳检测为什么还是两条带我要把一个65kb的野生大质粒酶切后进行连接,然后将连到载体上的质粒片断送测序以得到质粒全序列,现有的PUCmT是连接PCR产物用的是线 用质粒做为模板可以进行RT-PCR反应吗?如题 PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能直接测序,还要再酶切和提取质粒呢? 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 请问我的电泳图跑成这样,是为什么?我的模板用的是第一次PCR的产物,体系总共是60微升,模板2微我的第一次PCR用的是质粒DNA 而且产物条带还行 PCR试剂盒问题各位大虾好,我是一名菜鸟,最近遇到一个问题,我需要扩增一个长度为2500左右的DNA片段,该片段连在质粒上,我想订Takara公司的PCR试剂盒,但是不知道应该订哪一种,有哪位高士能指 如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? PCR产物和质粒双酶切后电泳如何判断酶切完成? 怎样区分染色体和质粒的PCR产物?怎样避免制备微量DNA的污染? 请问错误将质粒当成 pcr产物纯化了有什么补救办法吗 PCR条件优化请问高手PCR产物目的条带以下有杂带,PCR条件该如何优化? PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 为什么质粒不用PCR增殖而要用大肠杆菌复制? 我想在PCR产物上加一个酶切位点,请问正向引物和反向引物酶切位点系列一样吗? 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来